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ドレイズテストの代替 分離された牛角膜試験
原文はこちら
この試験は結膜への使用後の目の損傷を発見するために 作られたものである。

連絡先
Dr.B.Northover Department of Pharmacology
School of Pharmacy Leicesyer Polytechnic
Leicester,LEI 9BH UK Tel;England
533 551551 ext2271


論理的説明

この方法だと分離された角膜の準備の際に、 不透明性の進行の正確な測定が可能である。 毒性または刺激性混合物への反応での不透明性の 発生は、化学品が結膜への使用後にin vivoの 目に損傷を与える可能性を示すものとして、 この技術使用のための基礎となる。

基本過程

牛の目から角膜を取り除き、(必要であれば上皮と 内皮の層は取り除く)用意する厚さを決定する。 光の通過できる量を定めることにより、角膜の 不透明性が測定できるであろう。化学品に暴露 する前後の角膜の厚さと、そしてそれより重要 である角膜の不透明性の比較が化学品への 刺激性/毒性反応らしきものを示すだろう。

重要評価

現在この技術の限界は、水溶性の混合物のみにおいて 実験しやすいという点である。色の濃い混合物 を使用した場合には、角膜が汚れるので不透明性の 測定に障害がでるかもしれない。これは Opacitometerに適する色のフィルター を使用することにより解決が可能であろう。 この技術の更なる限界は、排水システムを 組み入れないなので、体内原位置の目を 正確にに示すことができない。新鮮な 牛の目の入手が不可能な地域の国もあるだろう。

この技術の一般的な利点は、正確に数量化できる 評価項目、一端必要な設備さえ入手できれば 施行するのに比較的簡単な技術で あること、動物の材料は屠殺場から入手できる こと、そして低価であることなどである。他の試験と 比較すると、in vivoドレイズ試験では 損傷の測定がより主観的に行われ、数量化がそれ程 容易ではない。受精卵、絨毛尿膜試験にも同じ 論議があてはまる。細胞培養細胞毒性試験、例えば 培養角膜などは角膜の多層構造を模倣できない。

このシステムではインテグラル構造を維持するので 混合物の測定された毒性は組織細胞を浸透する 能力と、その直接な細胞毒性反応、この両方を反映 するであろう。つまりin vivoの 状況をよりよく示すといえる。その外のより複雑な 試験、例えばウサギの回腸試験などでは 技術者のより熟練性が要求され、無傷の目の 準備はこの技術ほどは損傷の測定が正確で 感度が高くないだろう。

システムの改造;不透明性を決定する基本的 過程は同じでも、上皮と(または)内皮を 取り除くのは可能である。場合によっては 毒性反応が角膜のある層に関係があるかどうか (例えば、上皮または内皮依存の可能性)を 決定するのに有効であろう。また試験化学品を 角膜の上皮または内皮の一方、あるいは両方に 接触させることが可能である。;このような過程の 利点と、in vivo状況への最適な相互間系を もたらす方法はまだ評価中である。

in vivoの 刺激の予想は、物質を角膜の片側または両側に 使用することにより得るのが最適か、そして 上皮と(または)内皮を取り除くべきか、 作者たちは目下評価中である。さらに進んだ証拠が 蓄積されるまでつまり現時点で彼らは、上皮のみに 試験化学品を露出させた無傷の角膜がin vivo 状況への相互間系にはより適切なモデルであると 個人的な見解をだしている。

試験状態
組織内開発中

試験した化学品
陰イオン界面活性剤; トリエタノールアミン
デシル硫酸塩トリエタノールアミン
ラウリル硫酸塩トリエタノールアミン
ミスチル 硫酸ナトリウム デシル硫酸ナトリウム
ラウリルナトリウム カチオンの界面活性剤 ;
cetyltrimethylammonium bromide (臭化物)
myristyltrimethylammonium bromide (臭化物) 
lauryltrimethylammonium bromide(臭化物)
臭化物非イオン物質界面活性剤;
Tween 20 Tween 80 その他産業化学物
アリルアルコール ジオキサン エタノール
カービトール プロピレングリコール


試験を使用している組織
現在なし
参照 (省略)


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