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この方法で肝臓細胞の異集団の分離が可能になり、 この次に続く培養が説明できる。

基本手順

ラットの肝臓をカニューレに挿入し、緩衝機とともに 自然位灌流する 。次にそれを切除し、 コラナーゼ溶液とともに クローズドシステムに灌流する。一定期間の後、肝臓は 分裂するのでその時点で測定シリンダーに移し、 培養媒体を加える。次に細胞放出を 起こさせるために徐々に攪拌する。 それをフィルターにかけ、沈殿させる。二つの明確な 層より実質細胞と非実質細胞が形成され、その 分離ができる。

重要評価

細胞分離：他の特定の技術（例；薄切りの 後、酵素/機械的分散）と比べ、肝臓細胞の 入手が比較的迅速で繁殖可能な手順である。 このシステムでは、実質細胞と非実質細胞を 分ける他の方法で行われる勾配遠心法手順の 助けを借りずに特定の細胞種類を分離することも 可能。非実質細胞は更にKnook et al（1997）の eltration 手順によりKupffer と内皮細胞に 断片化できる。

毒性試験；この分離手順で、肝臓細胞の メジャーな集団のふたつ（例；実質細胞とシヌソイド細胞） においてのin vitro 毒性試験が可能になる。

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